Book/Report

FZJ-2018-03137

http://join2-wiki.gsi.de/foswiki/pub/Main/Artwork/join2_logo100x88.png Die Lysinbiosynthesesequenz in Corynebacterium Glutamicum : Regulation, Klonierung und Bildung von Lysin durch Genamplifikation

Cremer, J. (Corresponding author)FZJ*

1989
Kernforschungsanlage Jülich, Verlag Jülich

Please use a persistent id in citations: http://hdl.handle.net/2128/18649

Report No.: Juel-2291

Abstract: Bei den Untersuchungen zur Regulation der Lysinbiosynthese wurde als zentrale Kontrollstelle des Flusses von Aspartat zu Lysin, die gemeinsame Feedbackhemmung der Aspartatkinase durch Lysin und Threonin ermittelt. Keines der fünf weiteren Lysinbiosynthesegene wird in Enzymaktivität oder Enzymmenge reguliert. Trotzdem kommt der Dihydrodipicolinatsynthase eine wichtige Rolle bei der Flusskontrolle des Aspartatsemialdehyds zu Dihydrodipicolinat zu, da eine Erhöhung der DDP-Synthaseaktivität in einer erhöhten Lysinbildung resultiert. Durch die Klonierung der Gene der Lysinbiosynthesesequenz ab Aspartat, sowie des Gens der feedbackinsensitiven Aspartatkinase konnte die räumliche Nähe von $\underline{lys C}$ und $\underline{asd}$ Gen, sowie von $\underline{dap A}$ und $\underline{dap B}$ Gen gezeigt werden. Das $\underline{ddh}$ Gen und $\underline{lys A}$ Gen sind nicht geclustert. Das Aspartatkinasegen ($\underline{lys C}$) und das Aspartat-$\beta$-semi-aldehyddehydrogenasegen ($\underline{asd}$) sind in Form eines Operons organisiert. Es konnte gezeigt werden, daß die Aspartatkinase von zwei überlappenden Genen kodiert wird. Dabei konnte dem kleineren "$\beta$-$\underline{lys C}$" Gen, das ein Teil des "$\alpha-\underline{lys C}$" ist, die regulatorische d. h. AEC$^{r}$ verleihende Funktion zugeordnet werden. Die Transcription des asd Gens wird durch einen intergenen Promotor im $\underline{lys C}$ Gen initiiert, der gleichzeitig auch der Promotor des "$\beta-\underline{lys C}$" ist. Für den $\underline{dap A}$ und $\underline{dap B}$ Cluster wurde eine von der Orientierung unabhängige Überexpression im Enzymtest nachgewiesen, sodaß hier eine Organisation im Operon auszuschließen ist. Durch die individuelle Amplifikation der an der Lysinsynthese beteiligten Enzyme mit Hilfe der rekombinanten DNA Technik wurde die Kontrolle des Flußes von Aspartat zu Lysin und Diaminopimelat durch die Aspartatkinase und DDP-Synthase in $\underline{C. glutamicum}$ erkannt. Die Lysinausscheidung in $\underline{C.glutamicum}$ DG 52-5 wurde durch die gemeinsame Amplifikation der Aspartatkinase und DDP-Synthase um 60 % gesteigert.

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Contributing Institute(s):

1. Publikationen vor 2000 (PRE-2000)

Research Program(s):

1. 899 - ohne Topic (POF3-899) (POF3-899)

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Database coverage:

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